クローニングとサブクローニングの違いは何ですか
目次:
NS 主な違い クローン作成とサブクローン作成の間は クローニングは、生物のクローンまたは細胞またはDNAフラグメントのコピーの作成ですが、サブクローニングは、特定のDNA配列を親ベクターから目的のベクターに移動するために使用される手法です。。さらに、クローニングは一次cDNAまたは遺伝子を使用しますが、サブクローニングはベクターまたは一次インサートを変更することによるクローンのその後の操作を伴います。
クローニングとサブクローニングは、分子生物学において、目的のDNAフラグメントを導入することによって生物のゲノムを操作するための2つの手法です。
クローニング、発現ベクター、挿入、親ベクター、サブクローニング
クローニングとは
クローニングは、分子生物学の手法であり、目的のDNAフラグメントの複数の分子を作成するのに役立ちます。したがって、それは分子クローニングとしても知られています。遺伝子などのコーディングDNAと非コーディングDNAの両方、およびプロモーターを含む調節DNA配列をそれぞれ増幅するために使用できます。さらに、遺伝子フィンガープリントから大規模なタンパク質生産まで、さまざまな用途があります。
図1:分子クローニング
さらに、クローン作成の手順は次のとおりです。
- 断片化–制限消化によってDNA鎖を分解します
- ライゲーション–DNAの断片を目的の順序で接着します
- トランスフェクション–新しく形成されたDNA片を細胞に挿入する
- スクリーニング/選択–新しいDNAのトランスフェクションに成功した細胞の選択
ただし、クローニングとは、親生物から多数の遺伝的に同一の個体を生産することも指します。それは生殖の形で環境中に自然に発生する可能性があります。一方、組織培養技術のように実験室で行うこともできます。
サブクローニングとは
サブクローニングは、挿入DNAを親プラスミドから2番目のベクターに移動するのに役立つ分子生物学の手法です。ここで、第2のベクターは、DNAフラグメントの発現を可能にする発現ベクターであり得る。さらに、それは異なるプロモーターの下で発現を変えるために使用することができます。あるいは、2番目のベクターには、抗生物質の選択や蛍光発現のための特定のマーカーなどの特別な特性が含まれている場合があります。
図2:サブクローニング
- まず、制限消化によって親ベクターからインサートを放出して精製します
- 準備されたデスティネーションベクターにインサートをライゲートします
- 次に、ライゲーション反応を有能な細菌細胞に変換します
- 挿入物について形質転換細胞をスクリーニングする
クローニングとサブクローニングの類似点
クローニングとサブクローニングの違い
意味
クローニングとは、生物のクローンまたは細胞またはDNAフラグメントのコピーを作成するプロセスを指し、サブクローニングとは、特定のDNA配列を親ベクターから目的のベクターに移動するために使用される手法を指します。したがって、これがクローン作成とサブクローン作成の主な違いです。
重要性
ベクトルの種類
ベクターの種類は、クローニングとサブクローニングのもう1つの違いです。クローニングはしばしばクローニングベクターを使用しますが、サブクローニングは発現ベクターを使用する場合があります。
結論
クローニングは、目的のDNAフラグメントを宿主生物に導入したり、DNAライブラリーを構築したりするのに役立つ分子生物学の手法であり、サブクローニングは、親ベクターから別のベクターにもDNAフラグメントを導入するのに役立つ分子生物学の別の手法です。したがって、これがクローン作成とサブクローン作成の主な違いです。
参照:
1.「一般的なクローニングアプリケーションと戦略」。サーモフィッシャーサイエンティフィック–米国、こちらから入手可能。
画像提供:
1.コモンズウィキメディア経由のCNXOpenStax(CC BY 4.0)による「図17 01 06」2。アレクスピカルダル97による「分子クローニングのステップ」–コモンズウィキメディア経由の自作(CC BY-SA 4.0)
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