トランスフェクション効率の計算方法

トランスフェクション効率は、特定のサンプルの全細胞にトランスフェクトされた細胞の数を数えることで計算できます。細胞数は2つの方法で数えることができます。最も頻繁に使用される方法は、扱いやすいレポーターを使用することです。これらのレポーターは、緑色蛍光タンパク質（GFP）、ルシフェラーゼ、ベータガラクトシダーゼ、分泌型アルカリホスファターゼ（SEAP）です。トランスフェクション効率を計算するための最新の方法は、核酸を標識し、それらの細胞内送達を追跡できるようにすることです。ウエスタンブロッティング、免疫染色、機能アッセイなどの他のアプローチも、トランスフェクション効率の計算に使用できます。トランスフェクション効率は複数の実験パラメーターに依存するため、トランスフェクション効率の決定は、トランスフェクションに対するさまざまな要因の影響を決定するための鍵となります。

対象となる主要分野

1.トランスフェクション効率を計算するために使用される方法は何ですか –レポーターシステム 2.トランスフェクション効率の計算方法 –セルカウント

重要な用語：フローサイトメトリー、GFP、核酸ラベリング、レポーターシステム、トランスフェクション効率

トランスフェクション効率を計算するために使用される方法は何ですか

トランスフェクション効率の計算には、さまざまな種類の方法が使用されます。

1.レポーターシステム

–緑色蛍光タンパク質（GFP）–GFPはクラゲに自然に含まれています。 GFP遺伝子と目的の遺伝子を同時にトランスフェクトすることにより、トランスフェクトされた細胞の定性分析と定量分析の両方に使用されます。定性分析は、蛍光顕微鏡下で行うことができます。定量分析は、フローサイトメトリーによって行うことができます。 GFPに加えて、赤色蛍光タンパク質（RFP）、黄色蛍光タンパク質（YFP）もレポーターとして使用できます。蛍光タンパク質を発現する大腸菌コロニーを図1に示します。