NS 主な違い ニトロセルロースとナイロン膜の間は ニトロセルロースメンブレンはタンパク質結合に対して高い親和性を持っていますが、ナイロンメンブレンは核酸結合に対して高い親和性を持っています。 さらに、疎水性および静電相互作用は高分子をニトロセルロース膜に結合し、イオン性、疎水性、および静電相互作用は高分子をナイロン膜に結合します

ニトロセルロースとナイロンメンブレンは、高分子がゲルから移動する2種類のメンブレンです。ただし、ニトロセルロースメンブレンを使用してDNAやRNAを結合することもできます。

アフィニティー、ビオダインA、ビオダインB、ニトロセルロース、核酸、ナイロン、ポアサイズ、タンパク質

ニトロセルロース膜とは

ニトロセルロースメンブレンは、タンパク質結合親和性が高いため、ウエスタンブロッティングで使用される一般的なマトリックスです。ただし、固定化されたタンパク質や糖タンパク質以外の核酸の検出にも使用できます。高分子の固定化は、主に疎水性相互作用によって起こります。水素結合は、膜のニトロ基とタンパク質のアミノ酸側鎖の間にも形成されます。タンパク質の固定化は、高塩濃度と低メタノール濃度で高くなります。

図1：ブロットの原理

ニトロセルロースメンブレンは、均一な高表面積の100％純粋なニトロセルロースの形で入手できます。利用可能なプレサイズは0.2μmと0.45μmです。小さな細孔サイズは、小さなタンパク質（<14 kDa）との結合に適しています。タンパク質の結合および保持能力は80-250μg/ cmです²。組み立て済みのメンブレンはすぐに使用できます。ニトロセルロースメンブレンの主な利点の1つは、簡単にブロックできるため、バックグラウンドが非常に低いことです。サポートされているニトロセルロースメンブレンは、剥がして再プローブすることができます。

ナイロン膜とは

ナイロンメンブレンは、核酸の結合に広く使用されているマトリックスです。ナイロン膜は、ニトロセルロース膜よりも機械的に強力です。ブロッティングに使用されるナイロンメンブレンの2つの主要なタイプは、BiodyneAとBiodyneBです。両方のタイプのポアサイズは0.45μmです。それらは熱と溶剤に耐性があります。また、縮んだり、割れたり、破れたりすることもありません。どちらもニトロセルロースメンブレンよりもバックグラウンドが低くなっています。

図2：サザンブロットメンブレン

ニトロセルロースとナイロン膜の類似点

ニトロセルロースとナイロン膜の違い

意味

ニトロセルロースメンブレンとは、ブロッティングで核酸とタンパク質を固定化するために使用される粘着性のメンブレンを指し、ナイロンメンブレンとは、高分子を固定化するために使用される高強度と耐熱性を備えたタイプのメンブレンを指します。

で出来ている

ニトロセルロースメンブレンはニトロセルロースで構成され、ナイロンメンブレンは未修飾または正に帯電したBiodyneAおよびBiodyneBナイロンで構成されています。

細孔径

ニトロセルロースメンブレンのポアサイズは0.2μmと0.45μmですが、ナイロンメンブレンのポアサイズは0.45μmです。

強さ

ニトロセルロース膜はもろいため再利用できませんが、ナイロン膜は機械的に強力です。

転送方法

電気泳動転写は主にニトロセルロースメンブレンへのタンパク質の転写に使用されますが、キャピラリートランスファーはナイロンメンブレンの一般的な方法です。

アフィニティ

ニトロセルロース膜はタンパク質に対して高い親和性を持っていますが、ナイロン膜は核酸に対して高い親和性を持っています。ニトロセルロースメンブレンは核酸にも使用できます。

ブロッティング

ニトロセルロースメンブレンはウエスタンブロッティングに適していますが、ナイロンメンブレンはサザンブロッティングとノーザンブロッティングに適しています。

結合相互作用

疎水性および静電相互作用は高分子をニトロセルロース膜に結合し、イオン性、疎水性、および静電相互作用は高分子をナイロン膜に結合します。

タンパク質結合能力

ニトロセルロース膜のタンパク質結合能力は80-250μg/ cmです² ナイロンメンブレンのタンパク質結合能力は150-200μg/ cmです。².

結論

ニトロセルロースメンブレンは、主にウエスタンブロッティングでタンパク質を固定化するために使用される脆いメンブレンですが、ナイロンメンブレンは、主に核酸を固定化するために使用される強力なメンブレンです。ニトロセルロース膜は疎水性相互作用を介して分子を結合し、ナイロン膜は静電相互作用を介して分子を結合します。したがって、ニトロセルロースとナイロンメンブレンの主な違いは親和性です。

リファレンス：

1.「ウエスタンブロッティング用のニトロセルロースメンブレン|サーモフィッシャーサイエンティフィック–LK。」サーモフィッシャーサイエンティフィック、サーモフィッシャーサイエンティフィック、こちらから入手可能2。 「BiodyneAナイロンメンブレン、0.45 m、8 Cm x12Cm。」サーモフィッシャーサイエンティフィック、サーモフィッシャーサイエンティフィック、こちらから入手可能3。 「BiodyneBナイロンメンブレン、0.45 m、8 Cm x12Cm。」サーモフィッシャーサイエンティフィック、サーモフィッシャーサイエンティフィック、こちらから入手可能

画像提供：

1. Gbdiversによる「ブロット生物学」– Commons Wikimedia2を介した自身の作業（CC BY-SA 3.0）。 「サザンブロットメンブレン」BojanŽunar著– Commons Wikimediaによる自作（CC BY-SA 4.0）